亚欧洲精品在线视频免费观看,亚洲精华国产精华液,国产美女裸体无遮挡免费视频,色婷婷久久啪啪一区二区

免費(fèi)咨詢熱線:
技術(shù)文章
首頁 > 技術(shù)中心 > 流式細(xì)胞儀檢測(cè)樣品的制備方法

流式細(xì)胞儀檢測(cè)樣品的制備方法

 更新時(shí)間:2022-01-14 點(diǎn)擊量:1548
  流式細(xì)胞檢測(cè)樣品推薦制備方法:
 
  A. 直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體):
 
  (1) 、收集1×106個(gè)細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
 
  (2) 、用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞,800rpm離心5min。
 
  (3) 、用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測(cè)即可。
 
  (4) 、用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
 
  B. 未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
 
  (1)、收集2×106個(gè)細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
 
  (2)、用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
 
  (3)、用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
 
  (4)、加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
 
  (5)、加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
 
  (6)、加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測(cè)。
 
  (7)、流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
 
  C.細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
 
  (1)、待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液,然后2000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘,棄上清。
 
  (2)、用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存,至少固定18小時(shí)。
 
  (3)、調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
 
  (4)、PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。
jizz在线观看免费网站| 久久久久久久久久| 亚洲av无码国产综合专区| 清纯校花被c得欲仙欲死| 黑人巨大精品欧美黑寡妇av免费| 老卫抱着淑蓉进房间第八集视频| 蜜臀av无码精品人妻色欲| 国产福利视频| 2022最新韩国理伦片在线观看| 东北体育生巨大粗爽gay| 中文字幕爆乳巨爆乳系列| 宝贝你的小缝好紧好滑| 成免费crm在线看系统| 亚洲国产精华液网站w| 亚洲国产精品无码专区| 欧美国产在线播放欧美产品| 欧美成av人一区优播免| 少妇激情一区二区三区视频| 秋霞电影网院午夜伦不卡a片 | 樱花yy私人在线影院| 少妇被歹徒蹂躏惨叫小说| 一起碰一起噜一起| 国产人与禽zoz0性伦| 玩弄人妻少妇500系列| 国产精品亚洲一区二区三区| 少妇无码一区二区三区免费| 欧美《熟妇的荡欲》未删减版| 按摩男让我高潮做了3次正常吗 | 校花玉腿缠腰娇喘迎合| 无码一区二区三区在线观看| 我的变态室友(h)三攻一受| 无码视频一区二区三区| 亚洲av成人精品一区二区三区| 啊灬啊别停灬用力啊村妇| chinese农村老妓女| 粉嫩被两个粗黑疯狂进出| 亚洲 国产 日韩 在线 一区| 日本最新男男gayjapan| 强行扒开双腿猛烈进入免费版| 人妻~夫の上司犯感との| 无码少妇精品一区二区免费动态|